Sterilizace v domácích podmínkách
Sterilizace Petriho misek s agarovým mediem
- pro naše účely je nejvhodnější Papinův hrnec popř. větší kuchyňský hrnec
Postup
- do Papinova hrnce nalít vodu tak, aby její hladina byla cca 5—10
mm pod podložkou a aby jí bylo 1000—1500 ml
- vložit drátěnou podložku (viz Pomůcky)
- na drátěnou podložku položit čistý hadřík, tak aby pokrýval celý její
povrch
- vložit misky ve stabilizátoru (viz Pomůcky)
- nasadit víko hrnce (nechat otevřený ventil!!!) a zapnout plotnu
- 5 minut poté, co začala pára unikat ventilem ven, zavřít ventil
- jakmile začne pára unikat přes uzavřený ventil, stáhnout plotnu na 1/2
výkonu
- odměřit čas potřebný ke sterilizaci (viz výše)
- po uplynutí potřebné doby sundat hrnec z plotny a nechat vyrovnat
tlak
- otevřít OPATRNĚ hrnec (sundat víko) a nechat chvíli unikat páru ven
- vyndat všechny misky a vložit je nejlépe do lihem vytřené PP bedny
- pro jistotu sterilizaci opakovat ještě jednou po 24 h
Nemáte-li Papinův hrnec, můžete použít normální hrnec na vaření, ale media
vařit 3×60 minut po 24 hodinách.
Sterilizace obilného substrátu
Pomůcky
- 720ml sklenice (užší typ, ideálně šroubovací víčko)
- voda
- ječmen — dle mnoha mých pokusů se jeví jako nejlepší substrát
pro podhoubí, protože jeho obilky mají tvrdý obal, který zůstává neporušen
při sterilizaci a tím zabraňuje vniku případné kontaminace. Přímo u zemědělce
stojí kg do 15 CZK (záleží na odebíraném množství).
- vysoký zavařovací hrnec (30l, cca 500 CZK) s příslušenstvím
(vnitřní rošt a teploměr)
- peroxid vodíku — doporučuji 30% laboratorní (cca 130 CZK/l)
- alobal — čtverce 15×15 cm
- váhy — používám laboratorní váhy Denver Instruments DL-501 s váživostí
500 g a přesností 0,1 g (3500 CZK)
Postup
- sklenice důkladně vymýt saponátem a vypláchnout
- do každé sklenice odvážit 170 g ječmene, což je cca 150 g 100% suchého
- zalít 300ml vroucí vody a přiklopit víčkem
- nechat stát při pokojové teplotě (okolo 23 °C) 24 hodin
- vstříknout peroxid vodíku tak, aby jeho koncentrace v roztoku byla
0,3—0,5 %, tj. 3—5 ml 30% peroxidu vodíku do každé sklenice,
ve které je 300 ml vody
- nechat stát při pokojové teplotě (okolo 23 °C) 24 hodin
- slít vodu — stačí mírně nadzvednout víčko, aby voda odtékala,
ale zrní zůstalo ve sklenici (musí se omezit styk se vzduchem mimo
sklenici); další možností je nasazení perforovaného víčka, které se před
každým použitím musí otřít lihem na straně styku s ječmenem
- našroubovat víčko, ale ne pevně, aby se po ochlazení sklenice nevytvořil
uvnitř podtlak, který by při otevírání způsobil nasávání okolního vzduchu
a tím by se radikálně zvýšilo riziko kontaminace!
- překrýt alobalem
- do zavařovacího hrnce nalít 3 l vody
- naskládat dovnitř sklenice (15—16 ks)
- nasadit víko tak, aby pára mohla unikat pouze otvorem u teploměru
- nasadit teploměr
- jakmile teplota dosáhne mírně nad 100 °C, tak ještě 10 minut nechat
sporák na plný výkon a poté ztlumit tak, aby se voda v hrnci vařila
a rtuť na teploměru byla stále mírně nad ryskou 100 °C (já ji udržuji
na úrovni 104 °C)
- nechat vařit 90—105 minut
- 10 minut před koncem vaření připravit další várku, tj. zopakovat body
7—9
- po uplynutí doby vaření ihned sundat teploměr a víko hrnce
- vyndat všechny sklenice a vložit je nejlépe do lihem vytřené PP
bedny
- dolít vodu v hrnci na počáteční úroveň, zpravidla to je 1500 ml
- v případě sterilizace dalších várek opakovat body 11—19
- ještě 2× vždy po 24 h opakovat body 10—18 resp. 10—20
Časové schéma celé procedury
(D = 1 den resp. 24 hodin)
- D1: body 1—3
- D2: bod 5
- D3: body 7—20
- D4: body 10—20
- D5: body 10—20
Je to poněkud zdlouhavá a celkem i namáhavá procedura, ale zatím se mi
100% osvědčila, což nemohu říct o žádné jiné mnou doposud praktikované technice
sterilizace.
Její princip spočívá v tom, že zalitím vroucí vodou se usmrtí vegetující
mikroby a houby a vyprovokuje klíčení nových přeživších spor. Ty během 24
hodin rostou v ideálních podmínkách, jedná se o anaerobní organismus
Bacillus sp. a pravděbodobně i jiné. Přidáním peroxidu vodíku se usmrtí
velké množství jedinců a navíc peroxid pronikne do obilek. Následná
frakcionovaná sterilizace (Kochova) zredukuje počet bakterií na minimum.
Pravděpodobně se peroxid během sterilizace úplně nerozloží a jeho zbytky
brání klíčení spor kontaminantů, ale nebrání v kolonizaci myceliem
očkovaným z agarové kultury popř. ječmennou či prosnou kulturou G1.
Jeden sterilizační cyklus trvá 2 hodiny a celá procedura trvá 5 dní resp.
je třeba si udělat první dva dny čas na houby cca 1—2 hodiny a další
tři již dle rozsahu práce.
Oněch 15 sklenic po 170 gramech ječmene dá až 2,5 kg čerstvých nebo až
250 g sušených hub, ale není problém získat i 3 kg!
Zatím jsem tuto techniku testoval jen pro podhoubí Límcovky obří. Shii-take
budu testovat v brzké době.
Možná se tato technika zdá příliš náročná na přísun energie (na vaření).
Náklady na energii jsem spočítal následovně:
Na kompletní sterilizaci jedné várky se spotřebuje max. 1 m³ plynu,
který u Pražské plynárenské stojí pro domácnost kolem 11 CZK.
Průměrná sklizeň je 2,5 kg čerstvých hub z 15 sklenic a to vyjde na
11 korun + max. korunu na ohřev vody na zalití ječmene.
U nás se Límcovka obří v obchodech neprodává, alespoň jsem ji
ještě nikde neviděl, ale v USA stojí libra kolem 6 USD (= 13,2 USD
za kg), což je při kurzu 23,3 CZK/1 USD kolem 300 CZK!
Žampiony: 100 CZK za kg čerstvých hub (při 5—10% obsahu
vody je cena kg sušených 1000—2000 CZK)
Shii-take: 1600 CZK za kg sušených tj. při 15% obsahu vody
240 CZK za kg čerstvých hub
Myslím, že tato čísla mluví za vše.
Jen pro zajímavost: 1 kg sušených hřibů resp. směsi hřibovitých hub (Hřib
smrkový /Boletus edulis/, Hřib hnědý /Xerocomus badius syn. Boletus
badius/ a myslím, že ještě jeden nebo dva druhy) stojí cca 3000 CZK!