Agarová kultura
- slouí k vytvoření zásoby ivotaschopného mycelia, které se dále
můe pouít pro zaočkování obilného substrátu
nebo perlitového a pilono-otrubového
nosiče a nebo k selekci
- během selekce vybíráme ty části rhizomorfního mycelia (má podobu „kořínků“
a několik mm silných), které během kultivace na Petriho misce tvoří primordia
nejdříve, tím si zajistíme, e námi vyselektované kmeny budou plodit za
kratí dobu (= nií riziko kontaminace!)
- VŘELE DOPORUČUJI POUÍVAT AGAR ZAKOUPENÝ V LABORATORNÍCH
POTŘEBÁCH
Postup
- do Papinova hrnce nalít cca 1500 ml vody a dát vařit
- důkladně vymýt Vámi zvolený počet Petriho misek
- nalít medium (příprava viz Receptury)
do výky 3—5 mm
- misky naskládat do stabilizátoru
- sterilizovat 90 minut (viz Sterilizace)
- po vyrovnání tlaků nechat misky zchladnout na pokojovou teplotu (pokud
chcete pouít peroxid vodíku, tak po vyrovnání tlaků vyndejte misky z hrnce
a opatrně do kadé vstříkněte tolik peroxidu vodíku, abyste dosáhly
koncentrace 0,5—1 %)
- Petriho misky nechat ladem 48 h při pokojové teplotě na chráněném místě,
během této doby se objeví eventuální kontaminace
- vyloučit kontaminované misky
- nasadit vechny ochranné pomůcky (viz Pomůcky)
a rukavice sterilizovat lihem
- vysterilizovat skleněnou pracovní plochu lihem
- vysterilizovat celý skalpel lihem
- zapálit kahan
- nechat skalpel rozhavit do ruda
- zchladit pičku skalpelu v Petriho misce s mediem připravené
pouze k tomuto účelu (lze zchladit i přímo v očkované misce)
- pičkou skalpelu nabrat spory z otisku
- říznutím do media přenést spory
- vedle skalpelu je pouitelné i mikrobiologické inokulační očko
- očkovat lze i kouskem mycelia z kolonizované misky — přenesení
kousíčku rhizomorfního mycelia (cca 2—4 mm²) na plochu media
v nové misce